[辅助检查]第二节 PCR的引物设计和反应条件优化

获得特异性强、产量高的PCR反应产物需要正确设计引物和最佳的反应条件。以下主要从反应的特异性、敏感性、忠实性及扩增效率等方面讨论PCR反应条件的优化。PCR反应中加入一定浓度的增强剂，如二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide，DMSO）、甘油、非离子去垢剂、甲酰胺和牛血清白蛋白等可提高反应特异性和产量，有些反应只能在这些辅助剂存在时才能进行。但需要注意的是，这些增强剂浓度过高时，不仅不能提高PCR反应的特异性和产量，还会对PCR反应产生抑制作用（表2-。热启动可以防止模板变性不充分，同时还避免了 ......