二、标记探针的制备

自1987年德国Boehringer Mannhein公司首次推出地高辛DNA探针标记和检测试剂盒以来，由于标记方便快捷，较生物素一亲和素系统更为敏感，因此已成为非放射性标记中应用最多的方法。Dig‐dUTP可通过多种方法标记到核酸上，标记探针可与靶DNA杂交，其杂交产物上的地高辛可与酶标记的抗地高辛抗体结合，常用的酶为碱性磷酸酶，在存在底物5‐溴‐4‐氯‐3‐吲哚磷酸酯（BCIP）及硝基蓝四唑盐（NBT）时。单链探针一般均由DNA仪合成，片段较短，受杂交条件的影响较大，因此每一种探针都必须进行杂交条件的 ......