（三）基于DNA 甲基化修饰的循环扩增突变法

该类方法利用了甲基化的模板DNA对限制性内切酶Dpn Ⅰ敏感而新合成的突变DNA对Dpn Ⅰ抵抗的特性，借助Dpn Ⅰ切碎去除模板DNA（Dpn Ⅰ可特异性识别甲基化和半甲基化的GATC序列，该序列几乎在各种载体中都会出现，而且不止一次），从而得到突变DNA。研究表明，引入3个定点突变的效率为60%，引入5个定点突变的效率为30%。得到的其他载体是带有较少定点突变的载体，以引入5个定点突变为例，就是有约70%的转化载体是带有1～4个不同定点突变的载体（因为存在1～4个引物结合模板延伸形成单链环的可能）。这 ......