[辅助检查]四、基于Gal4的DNA结合蛋白分析技术

酵母单杂交（yeast one-hybrid）技术是一种体外分析DNA结合蛋白与其识别DNA序列之间相互作用的重要方法，通过对酵母细胞内报告基因活性的检测，来寻找潜在的DNA结合蛋白或对DNA结合位点进行分析。该方法的优势在于：利用基因文库筛选目的蛋白比传统的蛋白质分离纯化更为简单快捷。以酵母为模型研究DNA和蛋白质相互作用更能模拟真核生物的体内环境。在该检测系统中，将待测转录因子的功能结构域片段和Gal4的BD构建成融合表达载体，与含有BD识别序列的荧光素酶报告基因（Gal4-luc）质粒共转入酵母细胞 ......