一、PCR技术的建立和基本原理

随着DNA重组技术的产生和发展，如何快速获得目的基因（待检测或待研究的特定基因）片段成为瓶颈问题。但是，他最初建立的PCR技术所使用的酶是大肠埃希菌DNA聚合酶Ⅰ的大片段（Klenow片段），加热时会变性失活，每次循环都要重新加入，而且引物链延伸反应在37℃下进行，容易发生模板和引物之间错配，产物特异性较差，合成的DNA片段不均一。短产物片段”按指数倍数增加,而“长产物片段”几乎可以忽略不计。 ......