[辅助检查]二、限制性内切酶质粒分析

上述的三种质粒制剂中都含有残留的染色体DNA，虽然这些DNA的存在并不影响琼脂糖凝胶电泳作质粒分析，但却可影响质粒的消化。使消化后产生的线性DNA难以与质粒相区别，故须用下述方法制备可用于消化质粒。限制性内切酶:5～10μl/ml。将细菌接种于血平板或营养琼脂平板, 37℃孵育过夜。加2倍体积(约800μl)的丙乙醇,置室温2分钟，使DNA沉淀。再加1 μ l RNA酶，3 μ l 10倍反应缓冲液和2 μ l限制性内切酶（10～20U）。消化的DNA留有粘性末端，冷却后有可能在DNA片段之间形成氢键，影 ......