一、放射性核素示踪法用于蛋白磷酸化分析

最早用于细胞内蛋白磷酸化分析的方法是放射性核素示踪。事实上，只要有适宜的前体物质可以用于标记，放射性核素示踪理论上可以应用于所有的翻译后修饰分析。磷酸化蛋白在细胞总蛋白中所占比例有限，精确的分析需要将磷酸化蛋白与其他含磷酸分子（如磷酸胆碱、磷酸乙醇胺、磷脂等）相区别。在细胞内和无细胞体系中，以32P示踪为基础的蛋白磷酸化分析为细胞的物质代谢调节机制研究（如糖原合成和分解代谢）、细胞信号转导机制研究（如各种蛋白激酶的作用）等作出了重要贡献。上述这些困难和问题的解决方式之一是抗磷酸化氨基酸抗体的发展应用。 ......