1 .了解甲状腺激素受体( TR )转录激活作用模式。学习细胞培养技术,了解质粒、转染、荧光素酶报告基因的概念,学会利用瞬时转染哺乳动物细胞的实验方法检测外源化学物的拟/抗甲状腺激素活性。在未与甲状腺激素结合时, TR和视黄醇X受体RXR形成异型二聚体,结合在DNA上的甲状腺激素反应元件( TRE )上,处于沉默状态,当甲状腺激素和TR结合后,基因转录被启动,翻译表达甲状腺激素效应基因产物。然后将稀释后的转染试剂逐滴加入到稀释后的质粒中(注意不可将质粒加入转染试剂) 。2 .接种细胞、转染质粒和溶剂的稀释 ......