一、PCR引物的设计

引物直接影响PCR反应的特异性和产量。增强特异性可能会减少产量，引物设计的目的是在特异性和效率两方面取得平衡。目前，可以利用计算机软件方便地进行引物设计。引物设计软件会通过每一引物设计变化的预定值在两个目标间取得平衡，找出最佳引物。例如，在医学诊断中，需要以牺牲效率为代价调整引物以提高特异性，因为降低假阳性远比扩增产物的产量更为重要。以下是引物设计的基本原则。通常的PCR反应需要一对引物，分别与DNA两条链两端的序列互补，其中一个为正向引物（forward primer），另一个为反向引物（reverse ......