PCR反应每完成一个变性、退火、延伸的周期需2 ~ 4分钟。耐热Taq DNA聚合酶在90 ~ 95 ℃高温下仍保持活性,从而使PCR反应可以在一次性配制好反应液之后,于PCR仪上2 ~ 3小时内经过25 ~ 30个循环,自动完成扩增反应,中间无须添加聚合酶。引物的5端限定扩增产物的长度,对扩增特异性影响不大,可以根据需要在合成引物时于其5 端加修饰成分,如加入酶切位点或标记生物素、荧光素或地高辛或引入突变位点、启动子序列、蛋白质结合DNA序列。 ......