四、基于假病毒的表型耐药检测方法

可在生物安全Ⅱ级实验室进行实验。2）于37℃，5%CO 2细胞孵箱中孵育6小时，使质粒进入细胞，而后换液，于细胞培养箱中继续孵育48小时，假病毒分泌至上清液中。功能性假病毒的滴定: 1）收获大量假病毒后，加入牛血清终浓度达20%，分装冻存。2）取出假病毒在96孔板中做5倍稀释，8个梯度，每个稀释度4个复孔，终体积为100 μ l。加入含终浓度为15 μ g／m l DE AE‐dextran的TZM‐bl细胞100 μ l（10 5个细胞／ml），加入已获得的HIV‐1假病毒50 μ l，每孔相当于100 ......