免疫荧光显微技术是利用荧光显微镜观察细胞内或细胞表面结合的荧光抗体,从而对目标蛋白进行亚细胞水平定位和相对丰度的检测。基本过程是用温和的去垢剂处理标本切片中的组织或细胞使细胞膜被溶解,促进荧光抗体进入细胞,与细胞内的抗原进行反应。用甲醛固定细胞使其形状和所有的细胞蛋白质的定位保持稳定。洗涤除去游离的荧光抗体后,于荧光显微镜下观察,当激发光照到荧光染料上时,在黑暗背景上可见明亮的特异荧光。用组织培养细胞如Hep-2细胞或HeLa细胞涂片还可检出抗着丝点抗体、抗中性粒细胞胞浆抗体等。 ......