攻读研究生期间,导师是国内研究自噬方面的权威之一。我的课题方向是自噬与抗凋亡蛋白Bcl-2之间的关系,研究对象是细胞系PC12细胞(大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤,目前已广泛用于神经系统疾病的体外研究) 。正好我们实验室有这种细胞系,所以就不用从外面购买。实验过程中,我并没有转染外源蛋白进去,仅检测内源性Bcl-2蛋白表达。关于WB ,我想说明两点:首先,做某个蛋白的话,要注意细胞系的选择,动物组织取材部位,可能有些蛋白在某个细胞系或者组织部位没有表达,我们一厢情愿地希望在这上面表达,这就叫缘木求鱼。 ......