第四节　PCR扩增实验污染的惨痛教训

2005年6月，我收集了153株铜绿假单胞菌，采用传统的酚-氯仿法提取菌株DNA ，通过半定量PCR法检测与铜绿假单胞菌耐药相关的耐药基因A 、耐药基因B和耐药基因C ，以了解其耐药的基因型特征。冷静下来之后，我查找了相关资料，从PCR污染的源头上来说，可将其分为模板污染和PCR扩增产物的污染。在核酸提取过程中，由于收集标本的容器污染、容器外粘有标本、移液器污染和试剂污染等因素造成标本被污染。当空气与液体面摩擦时就可形成气溶胶，操作时比较剧烈地摇动反应管，开盖时、吸样时及污染移液器的反复吸样均可形成气溶胶 ......