通过Giemsa染色法以及荧光原位杂交等方法,可以观察染色体的数目和形态。然而,制备漂亮的中期染色体是后续实验顺利进行的关键步骤。选择处于指数生长期的单层培养细胞,融合度大约70% ,加入秋水仙素至终浓度为0.1 μ g/ml孵育2小时,镜下观察到上层圆形发亮细胞(停止在分裂中期的细胞) ,终止培养,胰酶短暂润洗,收集上层液体, 1 000rpm离心10分钟,倾去上清液,留沉淀细胞。经过不断摸索实验条件,不断地分析,每一步镜检来确认细胞数量,发现在固定后离心倾去上清液时,细胞数目丢失严重,考虑是由于固定以 ......