[病理生理]第二节 内质网相关酶活性的改变

（2）用0.25%的胰酶消化细胞，1500r/min离心5分钟，弃上清，加入1ml分离介质，用枪头反复吹打，使混合均匀，用超声波破碎仪粉碎细胞（350mA，2秒×7次），4℃750g 离心10分钟，弃去沉淀。 （3）将上清移入1.5ml 离心管中，4℃8000g离心30分钟，取上清液，4℃10 000g继续离心60分钟，沉淀即为内质网。 （4）在内质网的沉淀内加入1ml不含蔗糖的蛋白裂解液，充分混匀。 （5）在内质网样本中加入蛋白酶抑制剂（10mg/ml，PMSF10 l/ml，β-巯基乙醇5 l/ l） ......