第三节 PCR产物的鉴定方法

对PCR扩增片段检测系统的要求是准确、可重复地反映模板的性质和数量。目前，随着PCR技术的发展，PCR产物的检测手段也在增加，常用的有以下几种。变性的PCR产物被结合到预先结合于酶标板底的序列特异的寡核苷酸探针上(即固相化探针).实时定量PCR采用专用PCR仪，能够自动在每个循环的特定阶段对反应体系的荧光强度进行检测，实时地记录荧光强度的改变，可以做到PCR每循环一次就收集一个数据，建立实时扩增曲线，准确地确定起始DNA拷贝数，从而对样品的浓度进行精确的定量。实时定量PCR较以往常用的终点定量方法更加准确 ......