[辅助检查]二、常用工具酶

DNA体外重组主要涉及两种关键的工具酶，一是用于切割DNA的限制性内切核酸酶，二是用于连接DNA的连接酶。选用限制性内切核酸酶时，除需要了解内切酶的识别位点序列外，还应清楚内切酶的切割位点以及切割后DNA的末端特征，否则容易造成切割错误或影响DNA的连接。缓冲液对酶切效率的影响:内切酶活性的发挥需要合适的缓冲体系，目前商品化的内切酶均提供高盐、中盐和低盐缓冲液（表3-。侧翼序列能直接影响酶切效率，如两个内切酶的酶切位点相邻且切割位点分别位于5 ′-端和3 ′-端，切割后可能造成一个酶的侧翼序列缩短或丢失（ ......