[辅助检查]第四节 重组质粒的筛选鉴定

大肠杆菌是否携带了重组质粒需要筛选鉴定，与空载体区别出来，但仅靠肉眼是不能判断一个转化子是否携带了重组质粒还是空载体，在一些例外的情况下，携带重组质粒的克隆可能会比正常的小一些，这是因为表达外源蛋白的质粒延缓宿主细胞的生长。近年来建立了许多方法以区别带有重组质粒的克隆和空质粒，包括组织化学法检测转化细胞的β-gal活性，原位杂交，分析重组质粒的大小和PCR等方法。另外，酶通常保存在50%的甘油中，实验中，应将反应液中甘油浓度控制在1 / 10之下，否则，酶活性将受影响。 ......