3.蛋白质提取

蛋白质是基因的最终产物，是功能的执行者。在研究中需从细胞中提取蛋白质进行酶的活性分析和产物鉴定。此种方法利用SDS裂解细胞，再用超声的方法断裂DNA，所获得蛋白质溶液可以用于SDS-PAGE分析和Western blot。用橡胶刮下细胞(不要用胰蛋白酶消化),加入适量的PBS缓冲液，离心收获细胞。测定蛋白质浓度。Trizol试剂除了可以分离DNA和RNA外，还可用于蛋白质的提取。4℃、12 000g离心10分钟除去非需物质,转移上清（即含蛋白质的溶液）。此种方法用了蛋白酶抑制剂苯甲酰磺酰氟（PMSF），没 ......