[文献资料]二、反相液相色谱

早期的反相色谱填料是在硅藻土、多孔玻璃球、硅烷化硅胶、氧化铝或薄壳玻珠表面涂布一层非极性的异三十烷或十八烷固定液，构成反相色谱固定相。由于这类固定相在洗脱（特别是在梯度洗脱）时会有部分的溶解，柱寿命短，分离后的组分很难纯化，使其推广应用受到限制，目前已被反相键合填料所代替。本节主要讨论反相键合填料和疏水作用色谱填料。C18键合相由于过强的疏水性对蛋白质产生强保留，因而必须选用浓度较高的有机溶剂才能完成洗脱，这样又会导致生物大分子失活变性。在梯度洗脱中，为了增加体系的峰容量，缩短分离时间，可梯度增加洗脱液中 ......