[文献资料]第二节 化学降解法

在由A ﹒ Maxam和W ﹒ Gilbert创立的DNA化学测序方法中，制备了4套脱氧寡核苷酸，把一种碱基特异性化学试剂加到纯化的3 ′或5 ′末端标记脱氧寡核苷酸中，使DNA在1或2个特殊的核苷酸处随机断裂，由于只有末端标记的片段在随后的测序胶放射自显影中被看到。化学法是依据肼、硫酸二甲酯对DNA分子碱基进行特异性修饰，然后加入哌啶，来催化那些被修饰的核苷酸处链断裂，特异性存在于肼化、硫酸二甲酯或甲酸化的初次反应中，此反应中只对部分碱基作用，而次级反应，即哌啶使链裂解必须是定量的。在所有4种反应中，哌 ......