四、山羊胚胎干细胞的分离、培养与鉴定

机械法体外分离山羊胚胎干细胞，将其接种在经丝裂霉素灭活的小鼠成纤维细胞或STO饲养层上。分离的山羊胚胎干细胞具有胚胎干细胞的活性，表达胚胎干细胞相关蛋白Nanog、Oct4和SSEA‐3。培养4～5天后，选择生长集中、隆起明显、形态仍未分化的ICM集落，玻璃微针拨动内细胞团，使其与滋养层细胞分离。分散的内细胞团培养3～6天后，可见许多细胞集落，细胞折光性强。山羊ES细胞体积较小，细胞核较大，核仁明显，胞质较少。1 ﹒山羊囊胚在饲养层不易形成ESC样集落，ICM可形成ESC样集落。2 ﹒选择生长集中、隆起明 ......