第五节 蛋白质半衰期测定

调控蛋白质的稳定性是细胞调节其生长、分化和存活的方式之一。蛋白质的半衰期即蛋白质降解一半所需的时间，是用以衡量蛋白质稳定性的基本指标，蛋白质半衰期越长表明蛋白质在细胞内越稳定。目前，用于测定蛋白质半衰期的方法主要有两种：脉冲追踪标记法和放线菌酮阻断法。更换培养基，在不同时间裂解细胞，通过免疫沉淀对待测蛋白质进行追踪，放射性核素的衰变率代表检测蛋白质的降解率。对蛋白质区带进行密度扫描，依据密度计算蛋白质的半衰期：扫描各泳道显影条带的灰度值I，以ln（I）为纵坐标，时间（t）为横坐标作图，拟合线性方程ln（I ......