（三）免疫荧光法鉴定鼠脾细胞的IFN‐γ和IL‐4以区别Th1／Tc1和Th2／Tc2细胞

将脾组织切成小块,并用100 μ M的网过滤，分离脾细胞。其中一孔加:10μl PMA(1μg/m l)使其终浓度为10ng/ml, 10 μ l伊屋诺霉素（100 μ M）使其终浓度为1 μ M，10 μ l莫能星（200 μ M），使其终浓度为2 μ M。将细胞沉淀重悬于250μl预冷的固定液中。若不只一种细胞(例如,细胞来源于不同的动物或动物组），每种细胞都必须准备样本1～5份，因此，样本总数会根据细胞总数成倍增加。在有抗体的管中加入100 μ l细胞悬液，使抗体的终浓度为1 ∶ 40～1 ∶ 20 ......