[概述]四、实时荧光定量PCR技术

TaqMan技术是由PE公司于1995年开发的一种基于序列杂交反应原理的基因分型定量技术。该技术体系需要一对引物扩增包含SNP所在的序列，还需要一对等位基因特异性荧光共振能量转移探针，其5 ’端分别连有两种不同的荧光染料， 3 ’端连有通用的荧光淬灭基团。一个完整的探针，淬灭基团和荧光基团在空间上特别靠近而产生荧光淬灭。在靶基因扩增过程中， PCR引物和荧光标记探针在退火时均会与目标序列互补结合。Taq酶在延模板链延伸时遇到与模板稳定结合的探针， Taq酶的5 ’外切核酸酶会将与模板结合的特异探针降解，从 ......