（一）逆转录病毒包装细胞的基因转染

磷酸钙转染方法的关键因素是转染缓冲液的pH值、HEPES缓冲盐溶液（最适pH值是7 ﹒ 05～7 ﹒。在将目的基因转染和融合到T细胞杂交瘤细胞的过程中需要很高的病毒滴度，可以由通过感染的成纤维细胞获得高滴度的逆转录病毒。收获逆转录病毒包装细胞37℃用胰岛素溶液将细胞和培养板分开,用移液管将细胞吹散成单细胞悬液，以培养基10倍稀释、离心、弃上清。以新的培养基置换逆转录病毒包装细胞中的培养基,一边轻轻地振荡培养板一边将沉淀的DNA逐滴加入到培养基中。这种透明的低滴度病毒转染上清液可以被用来感染幼稚包装细胞，将 ......