（二）双链测序

随着DNA测序技术的不断改进和完善，双链DNA测序已越来越多地被采用。操作方便,省时省力，避免了制备M13单链DNA模板的繁杂工作。这取决于所用的DNA模板是质粒DNA或是PCR产物。一般若是质粒DNA，可采用标记引物或ddNTP的方法，若是PCR产物，则以标记ddNTP为好。这些载体上的多克隆位点便于外源DNA的插入，而多克隆位点两端都带有便于测序引物互补结合的序列，如M13正反向测序引物、SP6引物序列、T7引物序列、T3引物序列等。容易出现“假带”:这主要是DNA模板变性后在退火时形成链间局部配对而 ......