三、单个碱基的突变

图15‐2所示的是一单个碱基突变的应用。若一DNA具有两个ORF分别称为ORF1及ORF2，此两个ORF互相重叠，但转录的方向相反，若欲破坏ORF1但不影响ORF2，最简单的方法是进行单个碱基的突变。由于此突变株的ung基因也有缺失，不会制造尿嘧啶‐N‐糖基化酶，因此无法将DNA上的U除去，所以单股模板DNA含有U。所以只有不含硫的正常股DNA会被切开，因而产生一单股缺口，这时加入Exo Ⅲ可将正常股DNA，从缺口的3 ’端往5 ’端的方向切除大部分，然后再加入Klenow酶利用残留的部分为引物重新合成D ......