[辅助检查]三、目的DNA片段和载体片段的连接

DNA分子与载体分子连接是质粒重组过程中的重要环节之一，外源DNA片段末端的性质，以及质粒载体和外源DNA上限制酶切位点的性质决定了质粒与外源DNA连接反应的不同策略。将目的基因或序列插入载体，主要靠DNA连接酶和双链DNA黏性末端单链序列互补结合的配合使用。外源DNA带有互补突出端的连接:如果目的序列和载体上没有相同的限制性内切酶位点可供利用,用不同的限制性内切酶切割后的黏性末端不能互补结合，则可用适当的酶将DNA突出的末端削平或补齐成平末端，再用T4DNA连接酶连接，但平末端连接要比黏性末端连接的效率 ......