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[辅助检查](五)双链DNA加尾

通过以上各步反应后的产物放射性强度,计算出单链cDNA、双链cDNA和用S1核酸酶消化后的双链cDNA产量,计算出双链加尾后应增加的cpm值(按每条链增加20~40个dC基计算)。在Ep管中加入混合反应物:1mol/L CaCl2 5 μ L。向各反应管中加入:10mmol/L DTT 1 μ L。5%TCA和无水乙醇洗涤后于保温箱中干燥,再加入液闪液Omnifluor计数,测定时,将反应管置于冰浴中暂停反应.当cpm数增加,显示每个末端增加20~40个核苷酸时,向反应管中加入2 μ L 0.5mol/L ......

——《基因组学与蛋白质组学实验技术及常见问题对策》
书名:《基因组学与蛋白质组学实验技术及常见问题对策》
栏目:基因组学与蛋白质组学实验技术及常见问题对策 > 第一篇 基因组学研究常用实验方法The Experimental Method Commonly Used i Genomic Researc > 第六章 cDNA克隆与DNA序列分析方法及常见问题对策(cDNA cloning, DNA sequence analysis methods and strategies frequently asked questions) > 第一节 cDNA的合成和克隆 > 三、操作步骤
作者:郭葆玉
参编:
页码:194-195
版本:1
出版社:人民卫生出版社
出版时间:2010-12-01
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