一、用氯化钙制备和转化感受态大肠埃希菌

该方法可以用于批量制备感受态细胞，其转化效率可达到5 × 106～2 × 107个转化克隆／μ g超螺旋质粒DNA，足以进行质粒克隆。用此方法制备的感受态细胞可以在－ 70℃冻存。在菌株与菌株之间，OD590与每毫升中活细胞数间的关系变化很大，因此有必要通过测量特定大肠杆菌的生长培养物在生长周期的不同时相的OD590值，并将各稀释浓度的培养物铺于无抗生素的LB琼脂板以计算每一时相的活细胞数，从而使分光光度计读数达到标准化。每一体积（μ l）的转化克隆数× 105相当于每毫克DNA的转化数。将几个稀释度菌液 ......