[辅助检查]一、基因克隆技术的基本原理和步骤

通过体外重组技术，将一段目的DNA经切割、连接插入适当载体，并导入受体细胞，扩增形成大量子代分子的过程称为基因克隆。按照目的要求，借助工具酶的作用，将从生物的基因组文库、cDNA文库或直接用PCR或人工合成核酸的方法得到目的基因或序列以适当的连接方式插入到具有可供识别和筛选标志的克隆载体中，由载体携带目的序列有效地进入宿主细胞复制繁殖。大肠杆菌遗传背景清楚、操作容易、经济、表达水平高，是最常用的表达系统，但因缺乏真核转录后加工、翻译后加工等功能，所以不适用于真核基因组基因的表达。因此，真核生物蛋白质的表达 ......