[文献资料]第六节 细胞外基质成分mRNA表达

如能获得不同型别胶原的cDNA探针，则可用Northern印迹杂交、原位杂交等技术，检测成纤维细胞中胶原mRNA。Northern印迹杂交的要点是，用异硫氰酸胍／氯化铯超速离心法提取组织中总RNA并纯化。预杂交及与放射性核素标记的相应cDNA探针杂交。进行斑点杂交的开始部分与Northern印迹杂交相同，后将提取的总RNA加3%甲醛在65℃孵育5分钟。置于含甲酰胺等预杂交液中进行预杂交。有关这几种核酸杂交的技术细节，可参阅有关的专著，如方福德等主编的《现代医学实验技巧全书》上册。 ......