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六、避免非特异性PCR反应的方法

非特异性PCR反应的发生,通常是因为引物粘在不该粘的部位所致。若模板上的序列与引物的序列有一小部分互补,在常温下引物就会粘上去,而TaqDNA聚合酶就会开始制造DNA,因此造成非特异性的PCR反应。热启(hotstart)是避免此情形发生之一有效的方法。此法是将模板及试剂混合后先在94℃加热十分钟,使引物与模板分开后,再加入Taq聚合酶。另外,整个反应过程的温度都不低于50℃,在此情况下,引物不会黏在不应该黏的位置,非特异性PCR反应发生的可能性就会降低。因为PlatinumTaq聚合酶内含有抗Taq聚合 ......

——《应用分子生物学》
书名:《应用分子生物学》
栏目:应用分子生物学 > 第十三章 聚合酶链反应Polymerasechainreaction
作者:李昭鋐
参编:
页码:167-168
版本:1
出版社:人民卫生出版社
出版时间:2010-07-01
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