用LSCM观察的样品须尽量保持其天然状态,不能有变形和失真,故观察前需要对生物材料进行固定处理。制片必须薄而透明,才能在LSCM下成像,除将材料切成薄片或通过轻压使之分散外,还需对其透明和染色,以便更好地观察精细结构。常用固定剂为4%中性甲醛+ 0.1%Triton或丙酮、甲醇等有机溶剂。常用的封片剂是用90%甘油/ pH 8.5~9.0 PBS。 ......