二、凝胶过滤层析

凝胶过滤层析是一种简便而有效的蛋白质纯化技术，又称大小排阻、凝胶排阻、分子筛层析。这种方法利用分级分离，而不需要蛋白质的化学结合，具有设备简单、操作方便、分离迅速及不影响分子的生物学活性等优点，被广泛应用于各种蛋白质的分离纯化。凝胶过滤填料中含有大量微孔，只允许缓冲液及小分子质量蛋白质通过，而大分子蛋白质及一些复合物则被阻挡在外。中等大小的蛋白质可以进入填料中较大的孔内，它的流出速度介于大、小蛋白质之间。选出有活性的部分用SDS － PAGE检测所含蛋白质的数量和分子质量，合并含目的蛋白部分。 ......