脱磷酸化反应是双酶切DNA连接前的一个重要环节,该反应由碱性磷酸化酶催化,碱性磷酸化酶可去除线状DNA上的5 ′磷酸基团,而DNA的脱5 ′磷酸基团是基因重组、载体构建中防止载体DNA自身连接、环化的重要途径,载体经单酶切线性化后,3 ′端为羟基、5 ′端为磷酸基。DNA平末端的脱磷反应,与上述反应条件相同,均为37℃温育30min(亦有用10 min的)。 ......
——《基因组学与蛋白质组学实验技术及常见问题对策》
书名:《基因组学与蛋白质组学实验技术及常见问题对策》
栏目:基因组学与蛋白质组学实验技术及常见问题对策 > 第一篇 基因组学研究常用实验方法The Experimental Method Commonly Used i Genomic Researc > 第五章 DNA酶切与凝胶回收及常见问题对策(DNA digestion, gel extraction and strategies frequently asked questions)
作者:郭葆玉
参编:
页码:170-171
版本:1
出版社:人民卫生出版社
出版时间:2010-12-01