[辅助检查]五、提高酶切效率的对策

据多年实验室经验，酶切效率好坏会直接影响后续的连接与转化，因此，了解一些酶切知识和对策是基因工程技术至关重要的内容。DNA纯度、缓冲液、温度等条件及限制性内切酶本身都会影响限制性内切酶的活性。如果采用两种限制性内切酶,必须要注意分别提供各自的最适盐浓度。若需要不同的盐浓度，则低盐浓度的限制性内切酶必须首先使用，随后调节盐浓度，再用高盐浓度的限制性内切酶水解。限制性内切酶用量:对质粒DNA酶切反应而言,限制性内切酶用量可按标准体系1 μ g DNA加1单位酶，消化1～2小时。限制性内切酶酶解反应的一般最适条 ......