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四、PCR反应的污染问题

PCR产物因为分子数非常高,当反应后打开试管时,有部分的DNA会挥发到空气中,而污染另一个PCR反应使之变成假阳性反应。避免污染最有效的方法,是在PCR反应中加入dUTP及尿嘧啶‐DNA糖基化酶(uracil‐N‐gly cosylase,UNG),因为TaqDNA聚合酶无法区分dUTP与dTTP,所以反应中的dTTP可用dUTP来代替,因此形成的PCR产物为含有U的DNA。但以dUTP合成的PCR产物无法被限制性内切酶切开,若欲以限制性内切酶分析其产物时,可于反应中加入1 ∶ 1的dUTP及dTTP,如 ......

——《应用分子生物学》
书名:《应用分子生物学》
栏目:应用分子生物学 > 第十三章 聚合酶链反应Polymerasechainreaction
作者:李昭鋐
参编:
页码:166-167
版本:1
出版社:人民卫生出版社
出版时间:2010-07-01
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