二、凝胶过滤层析法测定蛋白质相对分子量

凝胶过滤层析法主要是按照蛋白质的分子大小和形状分离不同的蛋白质，因此可以以分子量标准品为参照，测定样品蛋白质的Mr。凝胶过滤层析法分离蛋白质的原理及一般操作详见第八章第四节。这里仅介绍涉及分子量测定的具体操作和注意事项。式中，K1和K2为常数，Mr为相对分子量，Ve为洗脱体积。在用凝胶过滤柱层析法测定分子量时，根据待测样品的分子量选择适宜的凝胶过滤基质，最常用的是葡聚糖凝胶。一般在完成层析后，要将柱床用水洗脱干净，并在最后的洗脱液中加入0.02%的叠氮钠作为防腐剂。也可以逐渐提高洗脱液中的乙醇浓度直至95 ......