完整RNA的提取和纯化,是进行Northern印迹、mRNA分离、cDNA合成、定量PCR及体外翻译等的前提。要得到高质量的RNA,在提取过程中需要注意:①有效破解样品细胞或组织。有效变性核蛋白复合体.实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两种,探针类是利用与靶序列特异杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类则是利用荧光染料或者特殊设计的引物来指示扩增的增加。引物长度在18~24个核苷酸之间,退火温度在49~59℃之间,3 ′末端不要出现G和C(具体步骤同前)。 ......