[患者教育]第一节 质粒DNA 的制备

质粒是细菌染色体外小型双链环状DNA复制子。碱性SDS裂解使质粒DNA从细胞中释放出来，而细菌染色体DNA留在细胞壁碎片上。在pH 12 ﹒ 0～12.5的碱性条件下，共价闭合环状的质粒DNA由于拓扑缠绕，两条互补链并不分开。当调节pH至中性时，质粒DNA大部分恢复其原来的共价闭环构型（CC型），一部分可能已造成单链缺口，但仍保持双股环状结构（OC型）。染色体DNA却不能复性到原来的双螺旋结构，这些单链染色体DNA常缠绕在细菌碎片上，通过在10 000r／min离心，可把细菌残片及缠绕于其上的变性细菌染色 ......