用至少15 × 10 6上面准备的效应细胞与1 ﹒ 5 × 10 5 APC(比率10 ∶。再过5天之后,丰富的敏感细胞通过Ficoll/Hypaque分离,洗一次再计数可见细胞。5天之后最后刺激一次。在培养3周后,加入新鲜的含IL‐2的培养基2周,5天后再刺激一次。如果CD4 + T细胞在培养基中占优势,CD4 + T细胞的消除步骤必须在细胞毒性试验开始前再重复一次。接着将有效细胞准备作细胞毒性试验,这些有效细胞也能用作克隆。 ......