该层将作为测定重氮反应物反射强度的参照背景,并提供所有测定胆红素的试剂。该法利用菲林(dyphylline,二羟丙基茶碱)使非结合性胆红素与白蛋白分离。随后非结合胆红素、结合胆红素和δ胆红素与重氮盐反应生成重氮胆红素。在520nm处,该呈色基团有相同的摩尔吸收系数和最大吸光度。总胆红素的浓度是通过双波长测定重氮胆红素色原的反射强度而确定的,在540nm和460nm处进行反射光强度的测定。 ......