方法与常规PCR基本相同,仅在退火温度上从以住的一个点(约55℃),而跨越10℃~20℃的范围。从第一个循环的退火温度55℃开始,以后每次递减1℃,直到41℃结束,共变化15个温度,在每个温度上均循环两个周期,共30个周期。以上二种方法,在设定退火温度时较复杂,但目前已有一些新型的PCR仪,可以在PCR扩增周期中自动进行温度改变。 ......