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[辅助检查](三)原位杂交

取已形成单层细胞的盖玻片,悬浮细胞可采用离心法,将细胞黏附到涂有明胶的载玻片上,制作组织印片、冰冻切片等标本。将RNA标记探针溶于杂交缓冲液中(5 × 107 cpm/mL放射强度)50%~70%去离子甲酰胺。向每张载玻片上滴加杂交液,使每张载玻片探针总量为2 × 105cpm,用一硅化的盖玻片盖住,封以不透性矿物油,42℃杂交过夜。将目的DNA和DNA探针放入90℃杂交炉,变性10min,使双链打开,在42℃,潮湿环境中杂交过夜。用标记的非特异性核酸片段作杂交标记的核酸探针,通常用pBR322质粒载体作 ......

——《基因组学与蛋白质组学实验技术及常见问题对策》
书名:《基因组学与蛋白质组学实验技术及常见问题对策》
栏目:基因组学与蛋白质组学实验技术及常见问题对策 > 第一篇 基因组学研究常用实验方法The Experimental Method Commonly Used i Genomic Researc > 第三章 分子杂交技术及常见问题对策(Molecular hybridization and strategies frequently asked questions) > 第一节 原位杂交技术 > 三、操作步骤
作者:郭葆玉
参编:
页码:90-97
版本:1
出版社:人民卫生出版社
出版时间:2010-12-01
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