[概述]三、肝细胞肝非实质细胞的球形聚集培养

笔者博士课题研究中也进行了肝细胞肝非实质细胞的球形聚集培养。将肝细胞、肝非实质细胞按2 ∶ 1比例混合、重悬，并在37℃水浴中旋转振荡，1小时后接种于poly HEMA被覆培养瓶内，置37℃、5%CO2、湿度100%条件下培养，每30min再旋转振荡1次，4小时后更换HDM，继续定时旋转振荡，至浮游单个肝细胞明显减少后适当延长振荡间隔。结果同微载体培养一样，混合肝细胞悬液旋转振荡1小时后出现明显的粘连倾向，接种时可见约95%的肝细胞呈簇状相连，悬浮于培养液中，在限制条件下培养8小时，黏附肝细胞进一步增多。 ......