当细胞破碎的时候,蛋白水解酶就会被释放出来或被激活,使双向电泳结果复杂化,影响最终结果分析。因此建议在样品制备时尽可能在低温下进行。对于在pH 9以上就失活的蛋白酶,可以用Tris碱,碳酸钠或碱性载体两性电解质抑制蛋白水解。对于在上述条件下仍然保持着活性的蛋白酶,应当使用蛋白酶抑制剂。每一种蛋白酶抑制剂只对某一类蛋白酶起作用,因此建议复合使用蛋白酶抑制剂。除了以上这些,在纯化和浓缩了蛋白样品之后,许多研究人员就会直接进行电泳了,但实际上还有一个重要的步骤不容忽视,那就是定量,这对于蛋白表达量的研究尤为重要 ......