三、基于重组蛋白的纯化策略

利用工程菌表达重组蛋白时，通过设计将一些信号肽与目的蛋白融合在一起，从而将重组蛋白构建成为分泌型蛋白，从培养基中直接回收。这样既避免了细菌裂解的处理过程，又降低了蛋白酶水解的风险性。但是，大多数表达的重组蛋白是胞内蛋白，通过改变cDNA序列，在构建重组质粒时，在蛋白序列的氨基端或羧基端加入少许几个额外氨基酸，构成特有的纯化标签，极大地方便了后续的分离纯化过程。常见的标签有下列几种：GST标签。在变性条件（如8mol/L尿素）下，重组蛋白中的His标签可以完全外露，能与Ni2 +螯合柱紧密结合。 ......